تطبيق تحليل HPLC في المبخر الدوار

يُطلق على كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC) أيضًا اسم كروماتوغرافيا السائل عالي الضغط، وكروماتوغرافيا السائل عالية السرعة، وكروماتوغرافيا السائل عالية الدقة، وكروماتوغرافيا العمود الحديثة. إنها تقنية فصل تحليلية فعالة وسريعة تم تطويرها بسرعة في السبعينيات، وهي وسيلة مهمة لاختبار الفصل الحديث.

يستخدم التحليل اللوني السائل عالي الأداء (HPLC) السائل كمرحلة متنقلة، ويعتمد نظام التسريب عالي الضغط لضخ الطور المتحرك مثل المذيب الفردي بأقطاب مختلفة أو المذيب المختلط والمحلول المنظم بنسب مختلفة في العمود الكروماتوغرافي مع الطور الثابت. بعد فصل المكونات الموجودة في العمود، تدخل إلى الكاشف للكشف، وذلك لتحقيق تحليل العينة.

آلية الفصل للكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء هي نفس آلية الفصل الكروماتوغرافي العمودي التقليدي، ولكن التعبئة أدق وتحتاج إلى الدفع بواسطة مضخة الضغط العالي، والتي تتمتع بكفاءة عمود عالية وسرعة تحليل سريعة. يختلف الطور المتحرك في كروماتوغرافيا الغاز عن كروماتوغرافيا الغاز، ويشارك أيضًا في عملية فصل المكونات، ويمكن تعديل تكوينها ونسبتها وقيمة الرقم الهيدروجيني بمرونة، مع أوضاع فصل مختلفة. ومن الناحية العملية، يتم تعديل قيمة الاحتفاظ وانتقائية العينات في العمود الكروماتوغرافي عن طريق تغيير تكوين الطور المتحرك، بحيث يمكن فصل العينات المختلفة.

 

مكونات تحليل HPLC

 

عمود: العمود هو المكون الأساسي لنظام HPLC الذي يستخدم لفصل المركبات في العينة. تشمل أعمدة الفصل الشائعة عمود الطور العكسي، وعمود التبادل الأيوني، وعمود ترشيح الهلام، وما إلى ذلك، ويعتمد اختيارها على خصائص المركب المراد فصله والغرض من التحليل.

المرحلة المتنقلة: الطور المتحرك عبارة عن مزيج من المذيبات المستخدمة في HPLC لتمرير العينة عبر عمود الفصل. يتكون الطور المتحرك عادة من خليط من المذيبات، والتي يمكن أن تكون مذيب واحد أو خليط من مذيبات متعددة بنسبة معينة. يعد اختيار التدفق المناسب أمرًا مهمًا جدًا لتأثير الفصل.

مضخة: تستخدم المضخة لتوفير الطور المتحرك ودفعه عبر عمود الفصل عند ضغط معين. تشمل المضخات الشائعة مضخة الضغط المستمر ومضخة التدرج. يمكن لمضخة التدرج تحقيق تغيير خطي أو غير خطي لتكوين الطور المتحرك، وذلك للحصول على تأثير فصل أفضل.

حاقن: يتم استخدام الحاقن لإدخال العينة المراد تحليلها إلى نظام HPLC. يمكن أن يكون جهاز أخذ العينات بمثابة حقنة يتم تشغيلها يدويًا أو جهاز أخذ العينات تلقائيًا. وعادةً ما تتميز بخصائص الحجم الدقيق والتكرار الجيد لضمان حقن العينة بدقة.

فرن العمود: يستخدم فرن العمود للتحكم في درجة حرارة عمود الفصل. من خلال التحكم في درجة الحرارة، يمكن تغيير معامل التوزيع وسرعة فصل العينة في العمود، وبالتالي تحسين تأثير الفصل.

الكاشف: يستخدم الكاشف لكشف المركب المنفصل وتوليد إشارة كهربائية تتعلق بتركيزه. تشمل أجهزة الكشف الشائعة كاشف الامتصاص المرئي فوق البنفسجي وكاشف الفلورسنت والكاشف الكهروكيميائي. يعتمد اختيار الكاشف على خصائص المركب المراد تحليله ومتطلبات حساسية الكشف.

نظام الحصول على البيانات: يستخدم نظام الحصول على البيانات لاستقبال وتسجيل وتحليل الإشارات الصادرة عن الكاشف. يمكنه تحويل الإشارة المكتشفة إلى معلمات مثل منطقة الذروة ووقت الاستبقاء، وتقديم تحليل وتفسير للنتائج.

 

بعد إزالة المذيب بواسطةمبخر دواروعادة ما تكون العينة التي تم الحصول عليها مركزة أو صلبة. إذا كنت ترغب في إجراء مزيد من التحليل أو الكشف عن المركبات الموجودة في العينة، فيمكنك تحليلها بواسطة التحليل اللوني السائل عالي الأداء (HPLC).

الخطوات العامة لتحليل العينات بعد التبخر الدوراني بواسطة HPLC

 

1. إذابة العينة: قم بإذابة العينة بعد التبخر الدوار في مذيب مناسب. وينبغي أن تؤخذ في الاعتبار قابلية ذوبان المادة المراد تحليلها ومتطلبات شروط تحليل HPLC عند اختيار المذيبات.

2. تحضير المحلول القياسي: إذا كانت هناك حاجة إلى تحليل كمي، فيمكن تحضير المحلول القياسي للمركب المراد اختباره للتصحيح اللاحق وحساب نتائج التحليل.

3. قم بإجراء تحليل HPLC: قم بحقن العينة في نظام HPLC وقم بإعداد عمود الفصل المناسب والطور المتحرك والكاشف. وفقا لغرض التحليل، حدد الأساليب والمعلمات المناسبة، مثل معدل التدفق ودرجة الحرارة وبرنامج التدرج.

4. جمع وتحليل البيانات: يتم جمع الرسم البياني للعينة بواسطة نظام HPLC، ويتم تحديد كمية المركب المستهدف أو تحديده وفقًا لمنطقة الذروة أو وقت الاحتفاظ أو المعلمات الأخرى ذات الصلة. يمكن استخدام طريقة المنحنى القياسي والطريقة القياسية الداخلية للتحليل الكمي.

5. تفسير النتائج: وفقا لنتائج التحليل، تم تقييم المركبات الموجودة في العينة نوعيا وكميا. وفقًا للاحتياجات، يمكنك إنشاء تقارير أو تسجيل نتائج التحليل.

 

إن تطبيق rotovap في تحليل HPLC له معنيان عمليان

 

• تركيز العينة: في بعض الحالات، قد يكون تركيز العينة المراد تحليلها منخفضًا جدًا، لذلك يمكن استخدام المبخر الدوار الكيميائي لتركيز العينة لزيادة حساسية الكشف للحليلة في HPLC.
• إزالة المذيبات: في بعض العينات، قد تتداخل المذيبات مع تحليل HPLC، لذلك من الضروري إزالة أو استبدال المذيبات الموجودة في العينات بمذيبات مناسبة لـ HPLC. يمكن أن يساعد المبخر الدوار في المختبر على إزالة المذيب وتحويل العينة إلى شكل مناسب لتحليل HPLC.

 

تحليل HPLC ومبخر دوارهما تقنيتان شائعتا الاستخدام في التحليل الكيميائي، ولديهما بعض الاختلافات والروابط من حيث المبدأ والتطبيق.

 

اختلاف

 

مبدأ: يعتمد HPLC على مبدأ التحليل الكروماتوجرافي السائل، ويتم الفصل والتحليل الكمي من خلال التفاعل بين الطور الثابت (العمود) والطور المتحرك (المذيب). يستخدم المبخر مبدأ التسخين والدوران لتبخير العينة السائلة بسرعة وإزالة المذيب، وذلك لتركيز العينة أو تغيير بيئة المذيب للعينة.

مجال التطبيق: يستخدم HPLC على نطاق واسع في الكيمياء والصيدلة والبيئة وغيرها من المجالات، ويمكن استخدامه لفصل المركبات في المخاليط المعقدة وتحديدها وتحليلها الكمي؛ يستخدم التبخر الدوار بشكل رئيسي في عملية تركيز العينة، وإزالة المذيبات وإعداد العينة، ويستخدم بشكل شائع في التخليق العضوي، واستخراج المنتجات الطبيعية، وإعداد العينات وغيرها من المجالات.

سرعة التحليل: عادةً ما يستغرق تحليل HPLC وقتًا طويلاً لفصل العينات وكشفها، وقد يستغرق ذلك عدة دقائق إلى عدة ساعات؛ يمكن لوحدة المبخر الدوار الفراغي تبخير العينات السائلة بسرعة في وقت قصير، وعادةً ما يستغرق ذلك بضع دقائق فقط.

 

يتصل

 

علاج العينة: غالبًا ما تُستخدم معدات المبخر الدوار لتركيز العينات أو إزالة المذيبات أثناء تحضير العينة لجعل العينات مناسبة لمزيد من طرق التحليل، مثل HPLC. يمكن تحسين تأثير ودقة تحليل HPLC من خلال تركيز العينة وإزالة المذيب بواسطة المبخر الدوار.

اختيار المذيبات: في تحليل HPLC، يعد اختيار المذيب مهمًا جدًا لتأثير الفصل؛ المبخر دواريمكن أن يساعد في إزالة المذيب من العينة وتحويل العينة إلى نموذج مناسب لتحليل HPLC. ولذلك، يمكن للمبخر الدوار توفير ظروف مذيبة مرضية لتحليل HPLC.

 

نحن نقدم روتوفاب للرفع اليدوي و روتوفاب للرفع الكهربائي، يرجى الاتصال بناsales@achievechem.comلتخصيص آلة المبخر الدوارة الخاصة بك.