الطرد المركزي منخفض السرعة

A الطرد المركزي منخفض السرعةتدور لإنشاء قوة الطرد المركزي التي تفصل مكونات الكثافة المختلفة في عينة. أثناء فصل الخلايا ، يتم فصل الخلايا ، وشظايا الخلايا ، وغيرها من الجزيئات الحيوية إلى مواقع مختلفة بواسطة قوة الطرد المركزي ، اعتمادًا على كتلتها وكثافتها. على وجه التحديد ، عندما يتم تدوير أنبوب العينة بسرعة عالية داخل دوار الطرد المركزي ، فإن قوة الطرد المركزي على المكونات المختلفة للخليط تتناسب مع كتلتها ، وتتأثر أيضًا بسرعة ونصف قطر الدوران. يتم إلقاء الخلايا أو الجسيمات الأكبر نحو قاع أنبوب الطرد المركزي ، بينما تظل المكونات الأصغر في الطبقة العليا. هذا مبدأ الفصل القائم على الكثافة والكتلة يجعل الطرد المركزي منخفض السرعة أداة مثالية لفصل الخلية.

● اختيار السرعة والوقت المناسبة للطرد المركزي: اختيار السرعة والوقت أمر بالغ الأهمية لفعالية فصل الخلية. قد تؤدي السرعة الدورانية عالية جدًا إلى تمزق الخلية أو تلفها ، في حين أن الوقت طويل جدًا قد يؤدي إلى تجميع الخلايا أو هطول الأمطار غير المكتمل. لذلك ، ينبغي النظر في اختيار المعلمات الطرد المركزي وفقًا لنوع وحجم وكثافة الخلايا.
● ضمان توازن العينة: توازن العينة هو مفتاح منع الطرد المركزي من توليد الاهتزاز والضوضاء أثناء التشغيل. عند وضع العينات ، من الضروري التأكد من أن العينات في جميع أنابيب الطرد المركزي متساوية أو كتلة مماثلة. إذا كان هناك اختلاف كبير في جودة العينة ، يمكن إضافة كمية مناسبة من العازلة أو المالحة العادية إلى أنبوب الطرد المركزي الأخف لتحقيق التوازن.
● حدد أنبوب الطرد المركزي الصحيح: جودة وضيقة أنبوب الطرد المركزي لها أيضًا تأثير مهم على فعالية فصل الخلايا. أنابيب الطرد المركزي عالي الجودة لها مقاومة ختم ومقاومة للتآكل ، والتي يمكن أن تمنع بشكل فعال تسرب العينة والتلوث. في الوقت نفسه ، يجب أيضًا تحديد مواصفات أنبوب الطرد المركزي وفقًا لحجم العينة وقوة الطرد المركزي المطلوبة.
● الانتباه إلى صيانة وصيانة الطرد المركزي: تنظيف غرفة الطرد المركزي بانتظام ودوار الطرد المركزي لمنع عينة التلوث المتبقي. امسح نظيفًا في الوقت المناسب بعد الاستخدام لتجنب التآكل الناجم عن بقايا السائل. في الوقت نفسه ، من الضروري أيضًا التحقق بانتظام من سلك الطاقة وسداده ومكونات الطرد المركزي الآخر بانتظام لضمان سليمة مخاطر السلامة وتجنبها.

● علاج الخلايا في الهندسة الوراثية: في الهندسة الوراثية ، غالبًا ما تحتاج الخلايا إلى الاستزراع ، ونقلها ، وفحصها وغيرها من العلاجات. يمكن استخدام الطرد المركزي منخفض السرعة لخطوات مثل التركيز وغسل تعليق الخلايا ، وكذلك جمع الخلايا بعد ترنسفكأيشن. عن طريق الطرد المركزي ، يمكن إزالة الشوائب والخلايا غير المنقولة في وسط ثقافة الخلية ، ويمكن تحسين كفاءة ونقاء ترنسفكأيشن الجينات.
● تنقية البروتين والعزلة: في أبحاث البروتين ، يجب تنقية البروتينات المحددة من العينات البيولوجية المعقدة. يمكن استخدام الطرد المركزي منخفض السرعة للتوضيح الأولي لحلول البروتين وإزالة الشوائب ، مثل حطام الخلايا ، والأحماض النووية ، وما إلى ذلك عن طريق العلاج بالطرد المركزي ، يمكن الحصول على محلول البروتين النقي نسبيًا ، والذي يوفر الأساس لخطوات التنقية اللاحقة.
● عزل وتنقية جزيئات الفيروس: عادة ما يكون لجزيئات الفيروس كثافة وحجم محددين ويمكن فصلها وتنقيتها بواسطة الطرد المركزي منخفض السرعة. على سبيل المثال ، في أبحاث الفيروسات ، يمكن فصل الجزيئات الفيروسية عن ثقافات الخلايا باستخدام الطرد المركزي التفاضلي. تستفيد هذه الطريقة من الاختلافات في قوى الطرد المركزي بسرعات مختلفة لفصل الجزيئات الفيروسية عن المكونات الخلوية الأخرى.
● الإنتاج ومراقبة الجودة للعقاقير البيولوجية: في عملية إنتاج الأدوية البيولوجية ، يتم استخدام الطرد المركزي منخفض السرعة غالبًا لتوضيح سائل ثقافة الخلية ، وإزالة حطام الخلية ، والفصل الأولي للمنتجات الدوائية. بالإضافة إلى ذلك ، في مراقبة الجودة للأدوية ، يمكن أيضًا استخدام الطرد المركزي منخفض السرعة للكشف عن المؤشرات الرئيسية مثل توزيع حجم واستقرار جزيئات الدواء.

◇ الفصل الأساسي: غالبًا ما تستخدم الطرد المركزي للسرعة المنخفضة للفصل الأولي لجزيئات الفيروس. في عملية استخراج الفيروسات ، يمكن إزالة جزيئات كبيرة مثل شظايا الخلايا والشوائب عن طريق الطرد المركزي منخفض السرعة ، ويمكن الحصول على تعليق الفيروس النقي نسبيًا. هذه الخطوة تسهل خطوات التنقية اللاحقة.
◇ إثراء الفيروس: في بعض الحالات ، يمكن أيضًا استخدام الطرد المركزي منخفض السرعة لإثراء الفيروسات. من خلال ضبط وقت الطرد المركزي والسرعة ، يمكن إيداع جزيئات الفيروس في أسفل أنبوب الطرد المركزي ، بحيث يمكن الحصول على عينة الفيروس المركزة عن طريق استخراج طاف. ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن تأثير التخصيب للطرد المركزي منخفض السرعة محدود نسبيًا ، وفي المناسبات التي تتطلب فيها الفيروسات عالية النقاء ، عادةً ما تكون طرق التنقية الأخرى مطلوبة.

 

● طريقة الطرد المركزي التفاضلي: طريقة الطرد المركزي التفاضلي هي وسيلة لفصل الجزيئات ذات الأحجام والكثافات المختلفة باستخدام سرعات مختلفة وأوقات الطرد المركزي. غالبًا ما يتم استخدام الطرد المركزي التفاضلي لإزالة الشوائب وتركيز الفيروس أثناء تنقية الفيروس. بعد إزالة جزيئات كبيرة مثل العضيات عن طريق الطرد المركزي منخفض السرعة ، يتم ترسيب جزيئات الفيروس عن طريق الطرد المركزي عالي السرعة.
● طريقة الطرد المركزي التدرج الكثافة: طريقة الطرد المركزي للتدرج الكثافة هي استخدام الوسائط ذات الكثافة المختلفة لتشكيل التدرج ، بحيث تستقر جزيئات الكثافة المختلفة على مواقف مختلفة في طريقة التدرج. في تنقية الفيروس ، غالبًا ما يتم استخدام الطرد المركزي للتدرج الكثافة لفصل جزيئات الفيروس عن الشوائب الأخرى ذات الكثافة المماثلة (مثل البروتينات والأحماض النووية وما إلى ذلك). من خلال إعداد التدرج الكثافة في أنبوب الطرد المركزي مسبقًا ، ثم إضافة تعليق الفيروس على سطح التدرج لطرد الطرد المركزي ، ستستقر جزيئات الفيروس في وضع معين في التدرج لتشكيل منطقة ترسيب.
● طريقة هطول الأمطار: طريقة هطول الأمطار هي إرجاع جزيئات الفيروس عن طريق إضافة الكواشف الكيميائية. تشمل العوامل المترسبة الشائعة كبريتات الأمونيوم ، غليكول البولي إيثيلين (PEG) ، وما إلى ذلك. يمكن استخدام طريقة هطول الأمطار لمزيد من التنقية من الفيروس. عن طريق ضبط تركيز وقيمة الرقم الهيدروجيني للممرض ، يمكن ترسيب جزيئات الفيروس بشكل انتقائي لإزالة الشوائب.
● طريقة الترشيح: طريقة الترشيح هي وسيلة لفصل جزيئات الفيروس عن الشوائب الأخرى عن طريق عمود كروماتوجرافيا ترشيح الهلام. يتم فصل عمود كروماتوجرافيا مرشح الهلام وفقًا لحجم الجسيمات ، وتتدفق الجزيئات الكبيرة من العمود الكروماتوغرافي أولاً ، وتتدفق الجزيئات الصغيرة لاحقًا. من خلال اختيار الظروف المناسبة للهلام والكروماتوغرافي ، يمكن فصل جزيئات الفيروس بشكل فعال عن الشوائب الأخرى.
● طريقة الكهربي: الطريقة الكهربية هي استخدام عمل المجال الكهربائي لجعل جزيئات مشحونة في طريقة ترحيل المجال الكهربائي. في تنقية الفيروس ، غالبًا ما يتم استخدام الكهربائي لفصل الجزيئات الفيروسية عن الشوائب الأخرى المشحونة. يمكن تحقيق الفصل الفعال وتنقية جزيئات الفيروس عن طريق اختيار ظروف ووسائط كهربائية مناسبة.

الوسم : الطرد المركزي منخفض السرعة ، الصين منخفضة السرعة المصنعة للطرد المركزي والموردين والمصنع