أنواع أعمدة كروماتوجرافيا HPLC
2. العمود الكوميماري (نوع الدوران)
3. العمود الكوميماني (يدوي)
*** قائمة الأسعار لكامل أعلاه ، استفسرنا عن الحصول على
الوصف
معلمات التقنية
أعمدة كروماتوجرافيا HPLCهي مكونات أساسية في كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء ، مصممة لفصل الخلطات المعقدة بناءً على التفاعلات بين المرحلة الثابتة والمرحلة المتنقلة. هناك العديد من أنواع الأعمدة ، كل منها مصمم لتطبيقات محددة. تعد أعمدة المرحلة العكسية (RP) الأكثر شيوعًا ، وذلك باستخدام مرحلة ثابتة غير قطبية مثل C18 أو C8 ، وهي مثالية لفصل المركبات العضوية القطبية وغير القطبية. تستخدم أعمدة الطور العادي (NP) مرحلة ثابتة قطبية ومرحلة متنقلة غير قطبية ، ومناسبة للتحليلات القطبية مثل السكريات والمنشطات. أعمدة التبادل الأيوني منفصلة أيونات بناء على شحنتها ، باستخدام مراحل ثابتة مشحونة للاحتفاظ بالتحليلات وإخلاصها من خلال التفاعلات الأيونية ؛ يتم استخدامها على نطاق واسع في التطبيقات الكيميائية الحيوية. تفصل أعمدة كروماتوجرافيا الحجم (SEC) جزيئات حسب الحجم ، مع وجود جزيئات أكبر بشكل أسرع بسبب محدودية الوصول إلى المراحل الثابتة التي يسهل اختراقها ، مما يجعلها ذات قيمة لتحليل البوليمرات والبروتينات. تتميز الأعمدة الحزفية بمراحل ثابتة لفصل الأدوات ، وهي حاسمة في المستحضرات الصيدلانية حيث قد يكون للاستريو الأنشطة البيولوجية المختلفة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم استخدام أعمدة كروماتوجرافيا التفاعل المحبب (HILIC) للمركبات القطبية التي لا يتم الاحتفاظ بها جيدًا في أعمدة RP ، مما يوفر آلية فصل بديلة. يخدم كل نوع عمود الاحتياجات التحليلية المتميزة ، وضمان فصل دقيق وفعال عبر مختلف الصناعات.
|
|
|
|
|
حدود
مقدمة
المبدأ الأساسي
تلعب الأعمدة الحركية دورًا محوريًا في فصل الأعماق ، وهي أجهزة استريانية هي صور مرآة لبعضها البعض ولكنها ليست قابلة للتطوير. تستخدم هذه الأعمدة المراحل الثابتة الرائعة (CSPs) ، والتي تم إنشاؤها عادة عن طريق تجميد المونومرات النشطة بصريًا على هلام السيليكا أو الدعم البوليمري. تقوم CSPs بإنشاء بيئة chiral داخل العمود ، مما يمكّن تمايز الأطراف المستندة إلى تفاعلاتها المادية المميزة مع هذه البيئة. تكمن الآلية الكامنة وراء الدقة اللولبية في الأنواع المتعددة من التفاعلات التي يمكن أن تحدث بين جزيئات التحليل الحويلي و CSP. تشمل هذه التفاعلات الترابط الهيدروجين ، وتفاعلات ثنائي القطب الثنائي ، والتكديس π-π ، والقوى الإلكتروستاتيكية ، والتأثيرات الكارهة للماء ، والتفاعلات النمطية أو المكانية. يسمح مزيج هذه التفاعلات لكل enantiomer بالتفاعل بشكل مختلف مع CSP ، مما يؤدي إلى اختلاف أوقات الاحتفاظ وبالتالي تسهيل فصلها. هذه القدرة حاسمة في مجالات مثل الأدوية ، حيث قد تظهر الأثرات الأنشطة الصيدلانية المختلفة أو السميات ، مما يستلزم طرقًا تحليلية دقيقة لفصلها وتحليلها.
الأنواع
وفقًا لمبدأ التصميم والمرحلة الثابتة ، يمكن تقسيم الأعمدة الشديدة إلى العديد من الأنواع ، بما في ذلك العمود اللولبي للفرشاة ، عمود السليلوز Chiral ، عمود Cyclodextrin chiral وما إلى ذلك.
فرشاة العمود اللولبي
العمود اللولبي للفرشاة هو نوع من عمود كروماتوجرافيا chiral مصمم لفصل enantiomers. إنه يتميز بمرحلة ثابتة تتكون من البوليمرات اللولبية أو القلة المرتبطة تساهميًا بدعم ، مما يخلق بنية "تشبه الفرشاة". يوفر هذا الترتيب مساحة سطحية عالية ومواقع تفاعل متعددة من الفوضى ، مما يعزز من قدرة العمود على التمييز بين الأطراف من خلال مختلف القوى بين الجزيئات. يتم تقدير الأعمدة اللولبية للفرشاة من أجل تعدد استخداماتها ، مما يسمح بالتخصيص لاستهداف فصلات الحول المحددة بشكل فعال.
- استنادًا إلى تصميم نمط التعرف على ثلاث نقاط ، تنقسم المرحلة الثابتة إلى نوعين: نوع استلام الإلكترون وتوفير نوع الإلكترون.
- π-elecctron قبول المرحلة الثابتة مثل (r) -n -3 ، 5- dinitrobenzoylphenylglycine المستعبدين إلى-أمينوبوبيل سيليكا هلام أكثر شيوعًا.
- من السهل توليف هذا النوع من العمود وله عامل قدرة عالية وعامل اختيار ، ولكن عادة ما يكون فعالًا فقط للمركبات العطرية.
عمود سيلولوز من نوع chiral
يستخدم عمود السليلوز السليلوز السليلوز ، وهو عبارة عن عديد السكاريد اللولبي الذي يحدث بشكل طبيعي ، كمرحلة ثابتة. تنبع البيئة اللولبية في أعمدة السليلوز من بنيتها الجزيئية الحلزونية ، مما يخلق ترتيبًا ثلاثي الأبعاد فريد قادر على التمييز بين الأثرات من خلال التفاعلات المجسمة. هذه الأعمدة فعالة للغاية لفصل مجموعة واسعة من المركبات الحول ، بما في ذلك الأدوية والكيماويات الزراعية والمنتجات الطبيعية. إن قدرتهم على توفير فصل موثوق وفعال بفعالية تجعلهم خيارًا شائعًا في اللوني التحليلي والتحضيري.
- قد تشمل المرحلة الثابتة ثلاثي الأطباق الصبغية ، وحمض تليبينزويك ، والسيلولوز بحمض الأحماض الأمينية الثلاثية ، إلخ.
- تظهر بعض أنواع أعمدة السليلوز ، مثل أعمدة OD ، فصلًا كبيرًا جدًا في ظل ظروف معينة.
- السليلوز والأميلوز هي بوليمرات خطية من d-glucose مرتبطة بواسطة -1 ، 4- glucoside أو -1 ، 4- السندات الجلوكوسيد. نظرًا لارتفاع وحدات الجلوكوز ، فإن كل سلسلة بوليمر لها أخدود حلزوني موجود على طول العمود الفقري السليلوز. يدخل enantiomers الأخدود ، ويتم فصل enantiomers بشكل رئيسي عن طريق الامتزاز والإدماج.
Cyclodextrin-type chiral العمود
يستخدم عمود Cyclodextrin chiral cyclodextrins كمرحلة ثابتة للفصل الحليمي. Cyclodextrins عبارة عن قلة السكريات الدورية مع تجويف غلبة ، مما يتيح التفاعلات المحددة المجسمة مع enantiomers. وهي تشكل مجمعات التضمين حيث يختلف ملاءمة الأدوات في التجويف ، مما يسهل فصلهم. هذه الأعمدة فعالة للغاية لحل مجموعة واسعة من المركبات الفنية ، بما في ذلك الأدوية والنكهات والعطور. إن الانتقائية والكفاءة تجعلهم خيارًا شائعًا في كل من اللوني التحليلي والتحضيري لتحقيق دقة الأيزومر الضوئية.
- تشكل جزيئات Cyclodextrin مخروطًا ، ويشكل كهفًا يتم تحديد حجم المسام بعدد وحدات الجلوكوبرانوز التي تشكل cyclodextrin.
- تشمل الأنواع الشائعة من cyclodextrins ، والتي تحتوي على وحدات 6 و 7 و 8 جلوكوبرانوز ، على التوالي ، من بينها -التثبيت الغلافيات -سيكلوديكسترين هو الأكثر استخدامًا على نطاق واسع.
- الهيكل الخاص لسيكلوديكسترين يجعلها لها خصائص فصل مختلفة من أعمدة كروماتوغرافيا تشارول البوليساكاريد. جزيئات cyclodextrin هي محبة للماء من الخارج والدهون من الداخل. لذلك ، يمكن أن تدخل الجزيئات العضوية الدهنية ذات الحجم والشكل المناسبين ، وخاصة المركبات العطرية ، تجويف السيكلوديكسترين وتشكل رابطة غير تسازية مع مجمع تضمين المضيف لفصل الفلاس.
التطبيقات
تحليل النشاط البيولوجي الفلوي
في مجالات الكيمياء الحيوية والطيد الحيوي ، يتم استخدام أعمدة الكروماتوغرافيا الشهية لتحليل المركبات الحزفية مع النشاط البيولوجي ، مثل الأدوية والمبيدات الحشرية والمنتجات الطبيعية ، إلخ.
التحضير الحزبي
في الصناعات الصيدلانية والمبيدات الحشرية ومستحضرات التجميل وغيرها من الصناعات ، يتم استخدام أعمدة الكروماتوغرافيا الفاترية لفصل وتنقية المركبات chiral لتحسين نقاء وتأثير المنتجات. على سبيل المثال ، يمكن تحضير الأدوية المرتفعة للنقاء من خلال أعمدة كروماتوجرافيا الحول لتلبية احتياجات العلاج السريري وتطوير المخدرات.
البوليمرات الحزفية
في مجال التوليف العضوي ، وحفز الحوافز وغيرها من المجالات ، تلعب أعمدة كروماتوجرافيا الحول دورًا مهمًا. على سبيل المثال ، يمكن استخدام أعمدة كروماتوجرافيا الفلفل الحار لفصل وتنقية مواد البوليمر مع chirality محددة ، والتي توفر دعمًا قويًا للبحث في مواد البوليمر وتطبيقه.
احتياطات
حدد العمود الأيمن
وفقًا للخصائص الكيميائية والبنية الجزيئية للعينة المراد اختبارها ، حدد نوع العمود الحويلي الصحيح. الأنواع المختلفة من المراحل الثابتة لها خصائص فصل مختلفة ونطاقات التطبيق ، لذلك يجب اختيارها وفقًا لظروف محددة.
تحسين ظروف الفصل
عند استخدام الأعمدة اللولبية ، من الضروري تحسين ظروف الفصل ، مثل تكوين مرحلة المحمول ، وقيمة الرقم الهيدروجيني ، ومعدل التدفق ، وما إلى ذلك. سيؤثر اختيار هذه الشروط بشكل مباشر على تأثير الفصل ودرجة الفصل.
انتبه إلى صيانة وصيانة العمود
من أجل إطالة عمر خدمة العمود اللولبي وتحسين تأثير الانفصال ، يجب تنظيف العمود وصيانته بانتظام. في الوقت نفسه ، من الضروري الانتباه لتجنب الأضرار التي لحقت العمود أثناء الاستخدام ، مثل تجنب استخدام المذيبات غير المتوافقة وتجنب الضغط المفرط.
تسجيل وتحليل النتائج التجريبية
عند إجراء تجارب مع الأعمدة اللولبية ، من الضروري تسجيل ظروف التشغيل والنتائج التجريبية بالتفصيل. من خلال تحليل ومقارنة النتائج التجريبية ، يمكننا تحسين ظروف الفصل وتحسين تأثير الفصل.
عمود Hilic القائم على البوليمر
عمود HILIC القائم على البوليمر فيأنواع أعمدة كروماتوجرافيا HPLCهي أداة فعالة لفصل المركبات القطبية ، والتي تلعب دورًا مهمًا في تقنية كروماتوجرافيا سائلة عالية الأداء (HPLC). سيتم تقديم ما يلي بالتفصيل من الخصائص والمبادئ والتطبيقات والاحتياطات الخاصة بأعمدة HILIC القائمة على البوليمر.
صفات
انتقائية عالية
نظرًا للمجموعات القطبية في المرحلة الثابتة لعمود HILIC القائم على البوليمر ، يمكن لهذه المجموعات أن تتفاعل بقوة مع المركبات القطبية من خلال ربط الهيدروجين ، والتفاعل ثنائي القطب والآليات الأخرى ، وذلك لتحقيق فصل انتقائي للغاية.
مناسبة لمجموعة متنوعة من المركبات
يعد عمود Hilic القائم على البوليمر مناسبًا لفصل أنواع كثيرة من المركبات القطبية ، مثل السكريات والأحماض الأمينية والببتيدات والنيوكليوتيدات ، إلخ
متانة
عادةً ما يكون للمرحلة الثابتة البوليمر استقرارًا كيميائيًا وميكانيكيًا جيدًا ، وبالتالي فإن عمود HILIC القائم على البوليمر لديه متانة جيدة ويمكنه تلبية احتياجات التحليل طويل الأجل وعالي التردد.
مبدأ
يعتمد مبدأ الفصل بين عمود HILIC القائم على البوليمر بشكل أساسي على آلية كروماتوجرافيا التفاعل المحبب (HILIC). في وضع Hilic ، فإن المرحلة الثابتة عبارة عن بوليمر مع مجموعات قطبية يمكنها ربط الماء في المرحلة المتنقلة لتشكيل "طبقة غنية بالماء". يمكن أن تدخل التحليلات هذه "الطبقة الغنية بالماء" والاحتفاظ بها ، في حين يمكن فصل المركبات المختلفة بسبب معاملات التقسيم المختلفة في "الطبقة الغنية بالمياه" والمرحلة المتنقلة. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن للمجموعات القطبية على سطح المرحلة الثابتة أيضًا تشكيل روابط هيدروجين وتفاعلات ثنائي القطب مع التحليلات لتعزيز تأثير الفصل.
التطبيقات
تحليل السكر
يمكن أن يفصل عمود HILIC القائم على البوليمر بشكل فعال من السكريات المختلفة ، مثل الجلوكوز والفركتوز والغلاكتوز وما إلى ذلك. تلعب هذه السكريات دورًا مهمًا في إمدادات الطاقة والدعم الهيكلي في الكائنات الحية ، وبالتالي فإن تحليلها الكمي له أهمية كبيرة لدراسة العينات البيولوجية.
تحليل الأحماض الأمينية والببتيد
يمكن للعمود HILIC القائم على البوليمر أن يفصل بين مختلف الأحماض الأمينية والببتيدات ، مثل السيرين ، وحمض الجلوتاميك ، والأرجينين ، وما إلى ذلك. هذه المركبات هي اللبنات الأساسية للبروتينات ، لذلك يلعب تحليلها الكمي دورًا رئيسيًا في أبحاث البروتين.
تحليل النوكليوتيدات
يمكن لأعمدة Hilic القائمة على البوليمر أن تفصل بين النيوكليوتيدات المختلفة ، مثل الأدينيلات ، والجوانييلات ، والنوكليوتيدات السيتوزين ، إلخ.
احتياطات
اختيار المرحلة المتنقلة
يجب أن يحتوي جزء من المرحلة المتنقلة على مذيب قطبي (3 ٪ على الأقل) بحيث يمكن امتصاص الطبقة المحبة للماء على سطح المرحلة الثابتة. عادةً ما يتم استخدام مزيج من الأسيتونيتريل والماء كمرحلة متنقلة ، ويتم التحكم في تأثير الفصل عن طريق ضبط نسبة الاثنين.
01
تحضير العينة
نظرًا لأن مجموعة المرحلة المتنقلة الضعيفة في HILIC مقسمة إلى أسيتونيتريل ، فإن العينة أرق لديها نفس تكوين الأسيتونيتريل مثل حالة المرحلة المتنقلة الأولية. ومع ذلك ، فإن معظم التحليلات القطبية لها قابلية ذوبان محدودة في المذيبات العضوية العالية ، لذلك يوصى بأسيتونيتريل\/الميثانول (75\/25) كعينة أرق. إذا كانت العينة قابلة للذوبان في الماء ، فيمكن حلها بالماء ثم تخفيفها باستخدام الأسيتونيتريل قبل الحقن.
02
وقت التوازن
سيؤدي وقت التوازن غير الكافي إلى انجراف وقت الاحتفاظ. لذلك ، قبل استخدام أعمدة Hilic المستندة إلى البوليمر ، من الضروري التأكد من أن الأعمدة متوازنة بشكل كاف.
03
الحفاظ على العمود
يمكن وضع التخزين على المدى القصير في أسيتونيتريل\/الماء (95\/5) ، إن لم يتم استخدامه لفترة طويلة ، يجب تخزينه في الأسيتونيتريل النقي ، ويتم تشديد المقابس في كلا طرفي العمود الكروماتوغرافي ومختومة لمنع سرير العمود من "التجفيف".
04
تمثل أعمدة كروماتوجرافيا التفاعل المائي المستندة إلى البوليمر (HILIC) تقدمًا كبيرًا في تقنية HPLC ، حيث تقدم تطبيقات واعدة وقيمة بحثية كبيرة. تتفوق هذه الأعمدة بسبب الانتقائية العالية ، مما يتيح الفصل الفعال للمركبات القطبية التي غالباً ما يكون تحديًا لتحليلها مع طرق المرحلة العكسية التقليدية. تتيح لهم براعة معالجة مجموعة واسعة من المركبات ، من الجزيئات الصغيرة إلى الجزيئات الحيوية مثل الببتيدات والنيوكليوتيدات ، مما يجعلها لا تقدر بثمن في تحليل العينة البيولوجية. تساهم متانة أعمدة HILIC القائمة على البوليمر في موثوقيتها في الاستخدام على المدى الطويل. لضمان نتائج دقيقة وقابلة للتكرار ، من الأهمية بمكان تحديد المرحلة المحمولة ، وتحسين إجراءات إعداد العينة ، والسماح بوقت توازن العمود الكافي ، والالتزام بممارسات تخزين الأعمدة المناسبة. تساعد هذه الاعتبارات في الحفاظ على أداء العمود وتمديد عمره ، مما يعزز أهميته في الكيمياء التحليلية الحديثة.
الوسم : أنواع أعمدة كروماتوجرافيا HPLC ، الصين HPLC أنواع الأعمدة كروماتوجرافيا المصنّعين والموردين والمصنع
زوج من
عمود كروماتوجرافيا مغدفي المادة التالية
أعمدة كروماتوجرافيا متجانسةإرسال التحقيق
